欧美一级在线-亚洲网址-精品三级-久久久一级片-13日本xxxxxⅹxxx20-激情小说在线视频-四虎黄色片-波多野结衣在线免费视频-污在线看-亚洲久久成人-五十路熟女丰满大屁股-99无码熟妇丰满人妻啪啪-激情成人av-香蕉钻洞视频-欧美天堂网站

　　影響ELISA試劑盒測定成果的原因和解決辦法，有哪些?

　　ELISA是什么?

　　ELISA是酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 的簡稱。它是在免疫酶技術的基礎上發展起來的一種新型的免疫測定技術 。

　　酶聯免疫吸附試驗的標準程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(capture Ab)固定在固相載體上，再加入一級檢測抗體(primarydetection Ab)，形成一個抗原抗體的復合物。如果該抗體已經用酶(enzyme)標記了，即可用來直接測定抗原的量，若無，則可利用另一個酶標記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質(substrate)，作用后產生出現的顏色深淺和樣本中的抗原量呈正比的關系，依此原理計算出樣本中的抗原總量或濃度。

　　ELISA試劑盒方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定，具有靈敏度高，操作簡略等優點，但是在詳細實驗過程中影響要素較多，而且要按照嚴厲的闡明要求，在臨床檢驗中除正常反響外，有時常可見到一些錯誤成果(即假陽性或假陰性成果)。

　　影響ELISA測定錯誤成果的原因主要有：

　　①標本要素;

　　②試劑要素;

　　③操作要素。

　　一、類風濕因子

　　人血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)能夠與ELISA系統中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結合，然后導致假陽性。

　　解決辦法:

　　1.用F(ab)2替代完好的IgG;

　　2.標本用聯有熱變性(63℃，10 min)IgG的固相吸附劑處理(將熱變性IgG加入到標本稀釋液中同樣有用);

　　3.檢測抗原時，能夠用2-巰基yi醇等加入到標本稀釋液中，使RF降解。

　　二、補體

　　ELISA系統中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發作變構，其FC段的補體C1q分子結合位點被暴露出來，使C1q 能夠將二者連接起來，然后形成假陽性。

　　解決辦法:

　　1.用EDTA稀釋標本;

　　2.用53℃，10 min或56℃，30 min加熱血清使C1q滅活。

　　三、嗜異性抗體

　　人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig(s) 結合的天然嗜異性抗體，可將ELISA系統中一抗和二抗連接起來，也能形成假陽性。

　　解決辦法:

　　可在標本稀釋液中加入過量的動物Ig(s)，但加入量不足或亞類不同時無效。

　　四、嗜靶抗原的本身抗體

　　抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等嗜靶抗原的本身抗體，有時能與靶抗原結合形成復合物，在ELISA方法中均可干擾抗原抗體測定成果。

　　解決辦法:

　　測定前需用理化方法將其解離后再測定。

　　本生一直視質量控制為企業的生命，追求企業競爭力的不斷提升。公司在經營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業精神作為標準，以過硬的質量和優良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創美好的未來。